Enzymimmunoassay

Der Enzymimmunoassay, ELISA (von lat. immunitas — Befreiung, Loslösung von etwas und fermentum — Sauerteig), ist eine grundlegende Methode der serologischen Labordiagnostik, die auf der spezifischen Bindungsreaktion zwischen Antigen und Antikörper beruht.

Im Gegensatz zur PCR, die das genetische Material des Virus nachweist, wird der ELISA meist zum Nachweis der immunologischen Spur (Antikörper) eingesetzt, die das Virus im Organismus des Patienten hinterlassen hat.

Ätiologie und Pathophysiologie

Der Methode liegt das Prinzip der molekularen Erkennung nach dem „Schlüssel-Schloss-Prinzip“ zugrunde. Der diagnostische Prozess besteht aus folgenden Schritten:

1. Auf den Boden der Vertiefungen einer speziellen Kunststoff-Mikrotiterplatte bringt der Hersteller vorab gereinigte Antigene des betreffenden Virus (beispielsweise des Masernvirus) auf;
2. Anschließend wird das Blutserum des Patienten hinzugefügt (wenn die Person an Masern erkrankt ist oder diese bereits durchgemacht hat, befinden sich in ihrem Blut Antikörper, die fest an die Antigene auf dem Boden der Vertiefung binden);
3. Um diesen Prozess sichtbar zu machen, werden sekundäre Antikörper, an die chemisch ein Enzym gekoppelt ist, in die Vertiefung gegeben; sie binden an den bereits gebildeten Komplex;
4. Im letzten Schritt wird ein Entwicklersubstrat hinzugegeben.

Das Enzym spaltet das Substrat und verändert dadurch die Färbung der Flüssigkeit in der Vertiefung. Je intensiver die Färbung (optische Dichte), desto höher ist die Konzentration (der Titer) der Antikörper im Blut des Patienten.

Klinische Signifikanz

Der ELISA ist das wichtigste Instrument zur Bestimmung des Stadiums eines Infektionsprozesses. Er ermöglicht dem Arzt nicht nur, den Kontakt des Patienten mit einer Infektion zu bestätigen, sondern auch die Antikörper in Klassen (IgM, IgG, IgA) einzuteilen und ihre Avidität (Bindungsstärke) zu bestimmen.

Mit der ELISA-Methode werden insbesondere folgende Untersuchungen durchgeführt:

• Screening von Spenderblut — auf HIV, Hepatitis und Syphilis;
• Testung schwangerer Frauen (TORCH-Komplex) — zur Bewertung des Risikos einer intrauterinen Infektion des Fetus.

Wenn der ELISA ein positives Ergebnis für Antikörper gegen eine neue Infektion liefert, erfordert die Diagnose häufig eine Bestätigung durch komplexere Methoden (beispielsweise Immunoblotting oder PCR).